1、溫度
利用溫度進行滅菌、消毒或防腐，是zui常用而又方便有效的方法。高溫可使微生（shēng）物細胞內的蛋白質和酶類發生變性而失活，從而起滅菌作用，低溫通常起抑菌作（zuò）用。
１）幹熱（rè）滅（miè）菌法:
a.灼燒滅菌法：利用火焰直接把微生物燒死。此法可靠（kào），滅菌迅速，但易焚毀物品，所以使用範圍有限，隻適合於接種針、環、試管口及不能（néng）用的汙染物（wù）品或實驗動物的屍體等（děng）的滅菌。
b.幹熱空氣滅菌法（fǎ）：這是實驗室中常用的一種方法，即把待滅菌（jun1）的物品均勻地放入烘箱中，升溫至160°C，恒溫1小時即可。
２）濕（shī）熱滅菌（jun1）法:
在同樣的溫度下，濕熱滅菌的效果比幹熱滅菌好，這是因為一方麵細胞內蛋白質含水量（liàng）高，容易變性。另一方麵高溫水蒸汽對蛋白質有高度的穿透力（lì），從而加速蛋白質變性而迅（xùn）速死亡。
a.巴氏消毒法：有些食（shí）物會因高溫破（pò）壞營養成分或影響質量，如牛奶、醬油、啤（pí）酒等，所以隻能用較低的溫度來（lái）殺死其中的（de）病原微生物，這樣（yàng）既保持食物的營養和風味，又進行了消毒，保證（zhèng）了食品衛生。該法一般在（zài）62°C，30分鍾既可達到消毒目的。
b.煮沸消毒法：直接將要消毒的物品放入（rù）清（qīng）水中，煮沸15分鍾，即可殺死細菌的全部營養和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸鈉或2%的石炭酸，則效果更好。此（cǐ）法適用於（yú）注射器（qì）、毛巾及解剖用（yòng）具的（de）消毒。
c.間歇滅菌法：上述兩種方法在常（cháng）壓（yā）下，隻能起到消毒（dú）作（zuò）用，而很難做到*無菌。若采用間歇滅菌的方（fāng）法，就能殺（shā）滅（miè）物品中所有的微生物。具體做法是（shì）：將待滅菌的（de）物（wù）品加熱至100°C，15~30分（fèn）鍾，殺死其中的營養體。然後冷卻，放入37°C恒溫箱中過夜，讓殘留的芽孢萌發（fā）成營養體。第2天再重複（fù）上述步驟，三次左右，就可達到（dào）滅菌的目的。此法不需加壓滅（miè）菌鍋，適於推廣，但操作麻煩，所需時（shí）間長。
d.加壓蒸汽滅菌法：這是發酵工業、醫療保健、食品檢測和微生物學實驗室中zui常用的一（yī）種滅菌方法。它適用於各種耐（nài）熱、體積大的培養基的滅菌，也適用於玻璃器皿、工作服等物品的滅菌。
加壓蒸汽滅菌是把待滅菌的物品放（fàng）在一個（gè）可密閉的加壓蒸汽滅菌鍋中進行的，以大量蒸汽使其中壓力升高。由於蒸汽壓（yā）的上升，水的沸點也隨之提（tí）高。在蒸汽壓達（dá）到1.055公斤/厘米2時，加壓蒸汽滅菌鍋內的溫度可達到121°C。在這種情況下，微生物（包（bāo）括芽孢）在15~20分鍾便會被殺死，而達到滅菌目的。如滅（miè）菌的對象是（shì）砂土、石蠟油等（děng）麵積大、含菌多、傳熱差（chà）的物品，則應適當延長滅菌時間。
在加壓蒸汽滅菌中，要引起注意的一個問題是，在恒壓之前，一定要排盡滅菌鍋中的冷空氣，否則表上的（de）蒸汽壓與蒸汽溫度之間不具對（duì）應關係，這樣會大大降低滅菌效果。
３）影響滅菌的因素
a.不（bú）同（tóng）的微生物或同（tóng）種微生物的不同菌齡對高溫的敏感性不同（tóng）。多數微生物的營養體（tǐ）和病毒在50~65°C，10分鍾就會被（bèi）殺死；但各種孢子（zǐ）、特別是芽孢zui能抗熱，其中抗熱性zui強的是嗜熱脂肪芽孢杆菌，要在121°C，12分鍾才被殺死。對同種（zhǒng）微生物來講，幼齡菌比老齡菌對熱更敏（mǐn）感。
b.微（wēi）生物的數量多少顯然會影響滅菌的效果，數量越多，熱死時間越長。
c.培養（yǎng）基的成分與組（zǔ）成也會影響滅菌效果。一般地講，蛋白質、糖或脂肪存在，則提高抗熱（rè）性，pH在7附近，抗熱性zui強，偏向兩極，則抗熱能力下降，而不同的鹽類可能對滅菌（jun1）產生不同的影響；固體培養基要比液體培養基滅菌時間長。
４）滅菌對培養基成分的影響
a.pH值普遍下降。
b.產生混濁或沉澱，這主要是由（yóu）於一些離（lí）子發生化學反（fǎn）應而產生混濁或沉澱。例如Ca+2與PO4-3化合，就會產生磷酸鈣沉澱。
c.不少培養（yǎng）基顏（yán）色加深（shēn）。
d.體積和濃度有所變化。
e.營養成分有時受到破壞。
２、輻射
利用輻射進行滅菌消毒，可以避免高（gāo）溫滅菌或化學藥劑消（xiāo）毒的缺點，所以應（yīng）用越來越（yuè）廣，目（mù）前主（zhǔ）要應用在以下幾個方（fāng）麵：
１）接種室、手術室、食品、藥物包裝室常應（yīng）用紫外（wài）線殺菌。
２）應用β射線作食品表麵殺菌，γ射線用於食品內部殺菌。經輻射後的食品，因大量微生物（wù）被殺滅，再（zài）用冷凍保藏，可使保存期延長。
３、過濾
采用機械方法，設計一種（zhǒng）濾孔比細菌還小的篩子，做成各種（zhǒng）過濾器。通（tōng）過過濾，隻讓液體培養基從篩子中流下（xià），而把（bǎ）各種微生物菌體留在篩子（zǐ）上麵，從而達到除菌的目的。這種滅菌方法適用（yòng）於一些對熱不穩定的體積小的液體培養（yǎng）基的滅菌（jun1）以及氣體的（de）滅菌。它的zui大優點是不破壞（huài）培養基中各種物質的化學成分。但是比細菌還小的病毒（dú）仍然能留在液體培養基內，有時會給實驗帶來一定的麻煩。
