1、溫（wēn）度

　　利用溫度進行滅菌、消毒或防腐，是zui常用而又方便有效的方法。高溫可（kě）使微生物細胞（bāo）內的蛋白質和酶類發生變性而失活，從而起滅菌作用（yòng），低溫通常起抑菌作用。

１）幹熱滅菌（jun1）法:

　　a.灼（zhuó）燒（shāo）滅菌法（fǎ）：利用（yòng）火焰直接把微（wēi）生物（wù）燒死。此法可靠，滅菌迅速，但易焚毀物品，所以使（shǐ）用範圍有限（xiàn），隻適合於接種針、環、試管口及不（bú）能用（yòng）的（de）汙染物品或實驗動（dòng）物的屍體等的滅菌。

b.幹熱空氣滅菌法：這（zhè）是實驗室中常用的一種方法，即把待滅菌的（de）物品均勻地放入烘箱中（zhōng），升溫至160°C，恒溫1小（xiǎo）時即可。

２）濕熱滅菌法:

　　在同樣的溫度下，濕熱滅（miè）菌的效果比幹熱滅菌好，這是因為一方麵細胞內蛋白質（zhì）含水量高，容（róng）易變性（xìng）。另一方麵高溫水蒸汽對蛋白質（zhì）有高度的穿透力，從而加速蛋白質變性而迅速死亡。

a.巴氏消毒法：有些食物會因（yīn）高溫破壞營養成分或（huò）影響質量，如牛奶、醬油、啤（pí）酒等，所以隻能用較低的溫度（dù）來（lái）殺死其中的病原微生物，這樣（yàng）既保持食物（wù）的營養和風味，又進行了消毒，保證了食品衛生。該（gāi）法一般（bān）在（zài）62°C，30分鍾既可達到消（xiāo）毒目的。

　　b.煮沸消毒法：直接將要消毒的物品（pǐn）放入清（qīng）水中，煮沸15分鍾，即可殺（shā）死細菌的全部營養和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸鈉（nà）或2%的石炭酸，則效果更好。此法適用於注射器、毛巾及解剖用具的消毒（dú）。

　　c.間歇滅菌法：上述兩種方法（fǎ）在常壓下，隻能起到消毒作用，而很難做到*無菌。若采用間歇滅菌（jun1）的方法，就能殺滅物品中所有的微生物。具體做法是：將待（dài）滅（miè）菌的物品加熱至100°C，15~30分鍾，殺死其中的營養（yǎng）體。然後（hòu）冷卻，放入37°C恒溫箱中過夜，讓殘留的芽孢萌發成營養（yǎng）體。第2天再重複上述步驟（zhòu），三次左右（yòu），就可達到滅菌的目的。此法不（bú）需加壓滅菌鍋，適於推廣，但操作麻煩，所需時間長。

　　d.加壓蒸汽滅菌法：這是發酵工業、醫療（liáo）保健、食品檢測（cè）和微（wēi）生（shēng）物學實驗室中zui常用的一種滅菌方法。它適用於各種耐熱、體積大的培養基的滅菌，也適用（yòng）於玻璃（lí）器皿、工作服等物品的滅菌。

　　加（jiā）壓蒸汽滅菌是把待滅（miè）菌的物品放在一個可密閉的加壓蒸汽（qì）滅菌鍋中進（jìn）行的，以大量蒸汽使其中壓力升高。由於蒸汽壓的上升，水的沸（fèi）點也隨（suí）之提高。在蒸汽壓達到（dào）1.055公（gōng）斤/厘米2時，加壓蒸汽滅菌（jun1）鍋內的溫度可（kě）達到121°C。在這種情況下（xià），微生物（包括芽（yá）孢）在15~20分鍾便會被殺死，而達到滅菌目的。如滅菌（jun1）的對（duì）象是砂土、石蠟油等麵積大、含菌多、傳熱差（chà）的物（wù）品，則應適（shì）當延長滅菌時間。

　　在加壓蒸汽滅（miè）菌中，要引起注意的一個問題是，在恒壓之前，一定要排（pái）盡滅菌鍋中的（de）冷空氣，否則表上（shàng）的蒸汽壓（yā）與蒸汽溫度之間不（bú）具對應關係，這樣會大大降低滅菌效果。

３）影響滅菌（jun1）的因素

　　a.不同的（de）微生物或同種微生物的不同菌齡對高溫的敏感性不同。多數微生物的營（yíng）養體和病毒在50~65°C，10分鍾就會被殺死；但各（gè）種孢子、特（tè）別是芽孢zui能抗熱，其中抗熱性zui強的是（shì）嗜熱脂肪芽孢杆菌，要在121°C，12分鍾才被殺（shā）死（sǐ）。對同種微生物來講，幼齡菌比老（lǎo）齡菌對熱更敏感。

　　b.微生物的數量多少顯然會影響滅菌的（de）效果，數量越多，熱死時間越長。

　　c.培養基（jī）的成分與組成也會影（yǐng）響滅菌效果。一般地講，蛋白質（zhì）、糖或脂肪存在，則提高抗熱性，pH在7附近，抗熱性（xìng）zui強，偏向（xiàng）兩極，則抗熱能力下降，而不同的鹽類可能對滅菌產（chǎn）生不同的影響；固體培（péi）養基要比液體（tǐ）培（péi）養基滅菌時間長。

４）滅菌對培養基成分的影響

　　a.pH值普遍下降。

　　b.產生混濁或（huò）沉澱，這主要是由於一些離（lí）子發生化學反應而產生混濁（zhuó）或沉澱。例如Ca+2與PO4-3化合，就會產生磷（lín）酸鈣沉澱（diàn）。

　　c.不少培養基顏（yán）色加深（shēn）。

　　d.體積和濃度有所變化。

　　e.營養成分有時受到破壞。

２、輻射

　　利用輻射進行滅菌消毒，可以避免高溫滅菌或化學藥劑消毒的缺（quē）點，所以應用越來越廣，目（mù）前主要應用在以下幾個方（fāng）麵：

　　１）接種室、手術室、食品、藥物（wù）包裝室常應用紫（zǐ）外線殺菌。

　　２）應用β射線作食品表麵殺菌，γ射線用於食品內部殺菌。經（jīng）輻射後的食品（pǐn），因大量（liàng）微（wēi）生物被殺滅（miè），再用冷凍保藏，可使保存（cún）期（qī）延長。

３、過濾

　　采用機械方（fāng）法，設計一種濾孔比細菌還小（xiǎo）的篩子，做成（chéng）各種過濾器。通過過濾，隻（zhī）讓液體培養基從篩子中流下，而把各（gè）種微生物菌（jun1）體留在篩子上麵，從而達到除菌的目的。這種滅菌（jun1）方法適用於一些對熱不（bú）穩（wěn）定的（de）體積小的液體（tǐ）培養基的滅菌以及（jí）氣體的滅菌（jun1）。它的zui大優點是不破壞（huài）培（péi）養基中各種物質的化學成分。但是比細菌還小的病毒仍然能留在液體培養基內，有時（shí）會給實驗（yàn）帶來一定的麻煩。